[DMNP-EDTA]
1-(4,5-dimethoxy-2-nitrophenyl)EDTA。Dimethoxynitrophenamine, 4Na。
1-(2-Nitro-4,5-dimethoxyphenyl)-1,2-diaminoethane-N,N,N',N'-tetraacetic Acid。
ケージド・カルシウムの一(Ellis-Davies,2007; 2008)。
EDTAに
【特徴】
◆励起光
・417nmでもなんとかいける(Sakaba)
365nmのようなUVよりも毒性低い可能性
◆選択性
・Ca親和性高いがMgとも親和性高い
(Kaplan&Ellis-Davies,1988; Gillis,1996 Xu,1997)
◆photolysis
・Ca2+:UVでKd=5nMからKd=3mMへ変化(180us以内に変化)
(McCray,Kaplan,1992)
・Mg2+:UVでKd=2.5nMからKd=3mMへ変化(180us以上)
(Neher,Zucker,1993; Zucker,1994)
【使用例】
(Heidelberger,Matthews,1994)
62 Cs-gluconate, 31.2 Cs-HEPES, 6.24 TEA-Cl
10 DM-Nitrophen, 10 CaCl2, 5 DPTA, 1 Furaptra(Magfula-2)
(Rieke&Schwartz,1996)
85 Cs-aspartate, 20 CsCl, 20 HEPES, 1 Mg-ATP, 0.1 Na-GTP,
0.1 leupeptin, 0.1 fluo-3, 3 DM-nitrophen, 2 Ca2+(pH 7.2)
200 W mercury arc lampで400nmのdichroic filter
UV(1.6mW/cm2; 340-400nm in the object plane)
cone 1sec程度の照射で[Ca]i 4uM程度上昇し放出200fF
(Wadel,Sakaba,2007)
135 Cs-gluconate, 20 TEA-Cl, 20 HEPES, 0.5 MgCl2,
5 Na2ATP, 0.5 Na2GTP, 1 EGTA, 2 DM-Nitrophen, 1.7 CaCl2,
0.5 Oregon-Green-BAPTA-5N (pH 7.2, 320 mOsm)
EGTAは[Ca]i減衰を早めるために加えた(Bollmann&Sakmann,2005)
EGTA 1mMで[Ca]i減衰の時定数10-20ms程度
より加えると放出遅くなり(Borst&Sakmann,1996)枯渇困難
UV flash lamp (1ms)
1 or 2 DM-nitrophen, 0.85 or 1.7 CaCl2, 0.5 or 0.8 MgCl2
(Schneggenburger&Neher,2000)
2011/10/05 masashi tanaka