FM1-43
関連概念 : 化学


  
  

疎水性色素の一。
FM体の一。

【性質】

  ・細胞膜に付着すると離れなくなり蛍光強度増大(Continuous vesicle cycling in the synaptic terminal of retinal bipolar cells
    エクソサイトーシスシナプス小胞に取り込まれても蛍光強い
      放出の積算が可能

【検出】

 ・5 or 10uM FM1-43
   ・ホールセル(-70mV)適用後に灌流
     細胞膜のみを染める(Lagnado et al. 1996)
     このときの蛍光強度で正規化
   ・
 ・photomultiplier tube (Thorn EMI, Middlesex, UK)
 ・40 Fluar oilimmersion objective (NA1.3)
 ・exciting beam
   ・250W tungsten—halogen lamp
     driven by a stable DC power supply
   ・passed through a bandpass filter centerde on 490 nm
     (7 nm half-bandwidth; Ealing Electro Optics)
   ・collected through a wider bandpass filter (515—565 nm; Zeiss)
     using a dichroic mirror (505 DRLP; Omega Optical, VT, USA)
   ・背景ノイズを減らす
     ・照射面を直径20umに
       circular pinhole (直径0.8mm)をphotomultiplier tube前に設置
     ・somaにpatch
     ・membranous dirtから離れたところで記録
 ・current-to-voltage converter
   ・low-pass filtered at 100 Hz (4-pole Bessel)
   ・acquired at 1 kHz
 ・igol
   ・Decimate関数で平均してsample intervalを10-20msに

【応用】

 ◆さまざまな研究に使われる(Imaging exocytosis and endocytosis
   ・膜容量では分からないエクソサイトーシスのみの観察(Simultaneous independent measurement of exocytosis and endocytosis)

2009/10/10 masashi tanaka

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