疎水性色素の一。
FM体の一。
【性質】
・細胞膜に付着すると離れなくなり蛍光強度増大(Continuous vesicle cycling in the synaptic terminal of retinal bipolar cells)
エクソサイトーシスでシナプス小胞に取り込まれても蛍光強い
放出の積算が可能
【検出】
・5 or 10uM FM1-43
・ホールセル(-70mV)適用後に灌流
細胞膜のみを染める(Lagnado et al. 1996)
このときの蛍光強度で正規化
・
・photomultiplier tube (Thorn EMI, Middlesex, UK)
・40 Fluar oilimmersion objective (NA1.3)
・exciting beam
・250W tungsten—halogen lamp
driven by a stable DC power supply
・passed through a bandpass filter centerde on 490 nm
(7 nm half-bandwidth; Ealing Electro Optics)
・collected through a wider bandpass filter (515—565 nm; Zeiss)
using a dichroic mirror (505 DRLP; Omega Optical, VT, USA)
・背景ノイズを減らす
・照射面を直径20umに
circular pinhole (直径0.8mm)をphotomultiplier tube前に設置
・somaにpatch
・membranous dirtから離れたところで記録
・current-to-voltage converter
・low-pass filtered at 100 Hz (4-pole Bessel)
・acquired at 1 kHz
・igol
・Decimate関数で平均してsample intervalを10-20msに
【応用】
◆さまざまな研究に使われる(Imaging exocytosis and endocytosis)
・膜容量では分からないエクソサイトーシスのみの観察(Simultaneous independent measurement of exocytosis and endocytosis)
2009/10/10 masashi tanaka