PCR
関連概念 : 実験法

[PCR: polymerase chain reaction]

DNAポリメラーゼ連鎖反応(Mullis,1993)。

【特徴】

 ◆熱安定性の高いDNA polymerase
  ・TaqDNA polymerase
    好熱性細菌 Thermus aquaticus由来
 ◆プライマー primer
 ◆thermal cycler(恒温装置)
 ◆増幅可能塩基対は数十から数千bp

【手続き】

 ◆熱変性 denature(95°C前後)
  〇反応溶液
   ・鋳型DNA
   ・primer
   ・dNTP
   ・DNA polymerase
  〇温度の設定
   ・DNA長さ
   ・酵素の種類
   ・増幅DNA断片の長さ
 ◆アニーリング annealing
   2種類のプライマーが結合
 ◆DNA伸長反応(extension)
   DNAポリメレースの最適温度まで上げる
   

【応用】

 ◆RAPD (random amplified polymorphic DNA)
   ランダムなオリゴヌクレオチド(10-20nucleotides)をプライマーに
   パターンの違いから生物種の違いを判断

2018/10/03 masashi tanaka

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