[neurobiotin]

N-(2-aminoethyl) biotinamide hydrochloride。
ニューロビオチン。分子量322.85（286という説も）。

ビオチンの一で、神経細胞の染色に用いる。
biocytinなどと比べ、溶けやすく、イオントフォレーシスで動きやすく、細胞内に長くとどまり、毒性が低く、ホルマリンやグルタルアルデヒドで固定できる。
ギャップ・ジャンクションの染色の報告もある。

【特徴】

　　・細胞内に長く留まる
　　・細胞毒性？（B Schlösser et al.,1998）
　　・ホルマリンやグルタールアルデヒドで固定するため免疫染色と併用可
　　・検出はアビジン-ビオチンシステムを利用（発色・蛍光いずれでも観察可）
　　・biocytinよりも分子量小さい
　　　　　ギャップ・ジャンクション通りやすい
　　・陰イオンにCl-があるので、Cl-[i]に注意。

【操作法（脳スライス標本）】

　　・記録電極の作製
　　　　ミクロフィラメント入りのガラスキャピラリー（外径1〜2mm）を牽引
　　・電極内液
　　　　　2％ NEUROBIOTIN Tracer
　　　　　1.0M メチル硫酸カリウム（または 1.0M 塩化カリウム）溶液
　　・細胞内への導入
　　　　　脱分極矩形波を2〜10分間通電（細胞内に拡散させる）
　　・切片の作製
　　　　　標本を 4％ PFA で一晩固定
　　　　　Vibratome で薄切するか凍結切片（40μm） を作製
　　　　　PBS で洗浄
　　　　　0.4％ Triton X-100/PBS 溶液で 1〜2 時間処理
　　・各種染色
　　　　　VECTASTAIN ABC 試薬＋ DAB 基質（発色による観察）
　　　　　アビジン＋酵素標識ビオチン＋ DAB 基質（発色による観察）
　　　　　蛍光標識アビジン（蛍光による観察）